Técnica de ácidos nucleicos

Seguridad y viabilidad de las células T editadas con CRISPR en pacientes con cáncer de pulmón de células no pequeñas refractario

Tipo de edición: Ex vivo, somática. Las células T del sistema inmunitario del paciente se extraen, se editan genéticamente fuera del cuerpo y luego se reintroducen.

Dirigido hacia: Células T, específicamente modificadas para eliminar el gen PD-1 (un punto de control inmunitario que limita la respuesta inmunológica), para potenciar la capacidad del sistema inmunitario contra el tumor.

Dirigido por: CRISPR-Cas9, sistema que usa ARN guía para cortar el ADN en el gen PD-1 en las células T.

Órgano a tratar: Pulmón, específicamente el tejido tumoral en cáncer de pulmón no microcítico avanzado.

Vía de administración: Infusión intravenosa de las células T editadas después de la modificación ex vivo.

Resultados a corto plazo: La infusión fue segura, con todos los eventos adversos relacionados siendo leves (grado 1 o 2). Las células T editadas fueron detectables en sangre periférica tras la infusión.

Resultados a mediano plazo: La supervivencia libre de progresión fue en promedio 7.7 semanas, con supervivencia global mediana de 42.6 semanas, indicando cierta actividad clínica aunque con margen de mejora.

Resultados a largo plazo: El estudio sugiere que la edición con CRISPR-Cas9 en células T es factible y segura, pero se requieren ensayos posteriores con mejoras para aumentar la eficacia terapéutica.

    Imagen obtenida CRISPR/Cas genome editing tool in the age of cancer treatment.

Referencia bibliográfica

1. Lu Y, Xue J, Deng T, Zhou X, Yu K, Deng L, et al. Safety and feasibility of CRISPR-edited T cells in patients with refractory non-small-cell lung cancer. Nat Med [Internet]. 2020;26(5):732–40. Disponible en: http://dx.doi.org/10.1038/s41591-020-0840-5

Terapia Celular en la Esclerosis Múltiple: Una Luz de Esperanza con Células Madre Mesenquimales

 En esclerosis múltiple remitente-recurrente, se emplean células madre mesenquimales (MSC), un tipo de célula madre multipotente adulta con propiedades inmunomoduladoras. Se obtiene mediante aspirado de médula ósea o liposucción de tejido adiposo, seguido de cultivo ex vivo. La vía de administración es intravenosa o intratecal. A corto plazo, niveles reducidos de IL-6 y TNF-α; a mediano, disminuyen recaídas y mejoran la EDSS (Expanded Disability Status Scale); ya largo plazo, mantienen la neuroprotección y mejoran la calidad de vida. Estudios como el ensayo MESEMS respaldan su potencial terapéutico en pacientes refractarios. 

Referencias

1.

Uccelli A, Laroni A, Brundin L, Clanet M, Fernandez O, Nabavi SM, et al. MEsenchymal StEm cells for Multiple Sclerosis (MESEMS): a randomized, double blind, cross-over phase I/II clinical trial with autologous mesenchymal stem cells for the therapy of multiple sclerosis. Trials [Internet]. 2019;20(1):263. Disponible en: http://dx.doi.org/10.1186/s13063-019-3346-z

2.

Uccelli A, Laroni A, Ali R, Battaglia MA, Blinkenberg M, Brundin L, et al. Safety, tolerability, and activity of mesenchymal stem cells versus placebo in multiple sclerosis (MESEMS): a phase 2, randomised, double-blind crossover trial. Lancet Neurol [Internet]. 2021;20(11):917–29. Disponible en: http://dx.doi.org/10.1016/S1474-4422(21)00301-X

ADN RECOMBINANTE

 ADN RECOMBINANTE ARTIFICIAL 

La α-glucosidasa ácida humana recombinante (rhGAA) es un ejemplo de ADN recombinante artificial aplicado al tratamiento de la enfermedad de Pompe, un trastorno genético lisosomal.

El gen humano GAA se inserta en vectores y se expresa en células CHO (ovario de hámster chino), ampliamente usadas por su capacidad de realizar modificaciones postraduccionales.

Estas células se cultivan en suspensión dentro de biorreactores, utilizando medios libres de suero para optimizar producción y glicosilación.

La enzima recombinante permite reemplazar la deficiencia enzimática en pacientes, reduciendo la acumulación de glucógeno en tejidos afectados.

Este sistema permite obtener proteínas humanas funcionales a gran escala y con alta pureza.

El caso de la rhGAA ilustra el potencial del ADN recombinante más allá de la insulina.

Es un claro ejemplo de biotecnología aplicada al tratamiento de enfermedades metabólicas hereditarias.

Imagen obtenida de: 

 ADN RECOMBINANTE EN LA NATURALEZA 

En este estudio se utilizaron células competentes naturales de Neisseria gonorrhoeae cultivadas en medio GC enriquecido, para investigar la recombinación natural del gen porB, involucrado en la variabilidad antigénica. El objetivo fue caracterizar los eventos de transferencia horizontal y recombinación homóloga que ocurren espontáneamente en este patógeno. Se aisló la secuencia porB directamente de cepas silvestres sin modificar, y para su análisis molecular se emplearon las enzimas de restricción BamHI y EcoRI, junto con T4 DNA ligasa para clonar el fragmento en el vector pBluescript SK(+). El vector recombinante fue introducido en células competentes de E. coli para su amplificación mediante transformación por choque térmico. La identificación de clones positivos se realizó mediante PCR específica y confirmación por secuenciación Sanger. Este enfoque permitió estudiar los mosaicos genéticos generados por recombinación natural en Neisseria sin alterar el proceso biológico original, reflejando la diversidad genética generada por mecanismos naturales.

Imagen obtenida de; 

Referencias: 

1.	El-Fakharany EM, El-Gendi H, Saleh AK, El-Sayed MH, Alalawy AI, Jame R, et al. The use of proteins and peptides-based therapy in managing and preventing pathogenic viruses. Int J Biol Macromol [Internet]. 2024;270(Pt 2):132254. Disponible en: http://dx.doi.org/10.1016/j.ijbiomac.2024.132254

2.	Manoharan-Basil SS, Gestels Z, Abdellati S, Akomoneh EA, Kenyon C. Evidence of horizontal gene transfer within porB in 19 018 whole-genome Neisseria spp. isolates: a global phylogenetic analysis. Microb Genom [Internet]. 2023;9(6). Disponible en: http://dx.doi.org/10.1099/mgen.0.001041 Busqueda: