sábado, 12 de julio de 2025

ADN RECOMBINANTE

 ADN RECOMBINANTE ARTIFICIAL 

La α-glucosidasa ácida humana recombinante (rhGAA) es un ejemplo de ADN recombinante artificial aplicado al tratamiento de la enfermedad de Pompe, un trastorno genético lisosomal.
El gen humano GAA se inserta en vectores y se expresa en células CHO (ovario de hámster chino), ampliamente usadas por su capacidad de realizar modificaciones postraduccionales.
Estas células se cultivan en suspensión dentro de biorreactores, utilizando medios libres de suero para optimizar producción y glicosilación.
La enzima recombinante permite reemplazar la deficiencia enzimática en pacientes, reduciendo la acumulación de glucógeno en tejidos afectados.
Este sistema permite obtener proteínas humanas funcionales a gran escala y con alta pureza.
El caso de la rhGAA ilustra el potencial del ADN recombinante más allá de la insulina.
Es un claro ejemplo de biotecnología aplicada al tratamiento de enfermedades metabólicas hereditarias.


 ADN RECOMBINANTE EN LA NATURALEZA 

En este estudio se utilizaron células competentes naturales de Neisseria gonorrhoeae cultivadas en medio GC enriquecido, para investigar la recombinación natural del gen porB, involucrado en la variabilidad antigénica. El objetivo fue caracterizar los eventos de transferencia horizontal y recombinación homóloga que ocurren espontáneamente en este patógeno. Se aisló la secuencia porB directamente de cepas silvestres sin modificar, y para su análisis molecular se emplearon las enzimas de restricción BamHI y EcoRI, junto con T4 DNA ligasa para clonar el fragmento en el vector pBluescript SK(+). El vector recombinante fue introducido en células competentes de E. coli para su amplificación mediante transformación por choque térmico. La identificación de clones positivos se realizó mediante PCR específica y confirmación por secuenciación Sanger. Este enfoque permitió estudiar los mosaicos genéticos generados por recombinación natural en Neisseria sin alterar el proceso biológico original, reflejando la diversidad genética generada por mecanismos naturales.

Referencias: 

1.El-Fakharany EM, El-Gendi H, Saleh AK, El-Sayed MH, Alalawy AI, Jame R, et al. The use of proteins and peptides-based therapy in managing and preventing pathogenic viruses. Int J Biol Macromol [Internet]. 2024;270(Pt 2):132254. Disponible en: http://dx.doi.org/10.1016/j.ijbiomac.2024.132254
2.Manoharan-Basil SS, Gestels Z, Abdellati S, Akomoneh EA, Kenyon C. Evidence of horizontal gene transfer within porB in 19 018 whole-genome Neisseria spp. isolates: a global phylogenetic analysis. Microb Genom [Internet]. 2023;9(6). Disponible en: http://dx.doi.org/10.1099/mgen.0.001041

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